无能的学生邪修大全

溶液pH与等电点pI比较

人性贪婪法（把 $H^{+}$ 当钱看） 把溶液里的氢离子（$H^{+}$）想象成「钱」

pH < pI（数值小）： ◦ pH 值越小，代表环境里的 $H^{+}$（钱）越多（酸性强）。 ◦ 环境里钱多得溢出来了，蛋白质为了平衡，就会贪污（抢夺）环境里的钱（$H^{+}$）。 ◦ 抢到了钱（$H^{+}$），身价自然就变「正」了 $\to$ 带正电pH > pI（数值大）： ◦ pH 值越大，代表环境里的 $H^{+}$（钱）越少（碱性强） ◦ 环境里太穷了，开始向蛋白质征税，把蛋白质身上的钱（$H^{+}$）抢走 ◦ 钱被抢走了，身价就变「负」了 $\to$ 带负电。

波长一锅端

A. 280 nm（紫外吸收法）： • 这是蛋白质里的芳香族氨基酸（色氨酸、酪氨酸）自带的紫外吸收峰。 • 记忆： 280 是个很整的数字，代表蛋白质的“裸体”本色，不需要任何染料，直接测。

B. 540 nm（双缩脲法）： • 这是双缩脲反应（肽键 + 铜离子 $\to$ 紫红色）的吸收峰 • 记忆： 540 $\to$ 我是零（双缩脲法灵敏度比较低，接近于0...虽然夸张了点，但它确实不如BCA和Bradford灵敏）

C. 595 nm（Bradford法/考马斯亮蓝法）： • 正解。 染料与蛋白质结合后，最大吸收峰从 465 nm 移到 595 nm。

D. 650 nm： • 这个波长通常不作为主要考点，有时 Lowry法（Folin-酚试剂法） 会在 750 nm 或 660 nm 附近测定。

蛋白质分子量计算

$$\text{蛋白质分子量}\approx \text{氨基酸数量}\times 110$$

rRNA的大小亚基

邪修心法第一式：奇偶大对决（357 vs 468）

这是最核心的口诀，记住了这个，框架就搭起来了。

• 原核生物（Prokaryotes） = 奇数阵营 (3, 5, 7)
  • 数字全看十位数：
  • 30S（小） + 50S（大） = 70S（总）
  • 口诀： 原核比较原始，只有“单”枪匹马（奇数 3、5、7）。
• 真核生物（Eukaryotes） = 偶数阵营 (4, 6, 8)
  • 数字全看十位数：
  • 40S（小） + 60S（大） = 80S（总）
  • 口诀： 真核比较高级，讲究成双成对（偶数 4、6、8）。

(注：生物学里的加法不是直接相加，30+50=70是因为沉降系数涉及形状，不是单纯重量，但这不重要，记住口诀就行)

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邪修心法第二式：内部拆解（如何记rRNA）

框架搭好了，现在填里面的肉（rRNA）。

1. 小亚基里的rRNA：未成年 vs 成年

• 原核（小 30S） -> 16S
  • 记忆法： 原核生物比较低级，还是“未成年”，所以是 16 岁（16S）。
• 真核（小 40S） -> 18S
  • 记忆法： 真核生物进化完全了，是个“成年人”，所以是 18 岁（18S）。

2. 大亚基里的rRNA：数字游戏

这里有个公约数：5S。不管原核还是真核，大亚基里都有一个 5S（可以理解为这是出厂标配，不用记）。

剩下的那个难记的数字怎么办？

• 原核（大 50S） -> 23S
  • 邪修算法： 看看那个 50S。
  • 2 + 3 = 5。
  • 所以原核是 23S（对应50S）。
• 真核（大 60S） -> 5.8S 和 28S
  • 邪修算法： 真核是偶数阵营，所以它不仅多了一个 5.8S，而且最大的那个也是以 8 结尾的 28S。
  • 记忆： 真核特别“发”（8），有 5.8 还有 28。

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总结一张“作弊小纸条” (脑内版)

阵营	口诀 (十位)	小弟 (小亚基)	大哥 (大亚基)	备注
原核	3、5、7 (奇数)	16 (未成年)	5 (标配) + 23 (2+3=5)	比较穷，rRNA少
真核	4、6、8 (偶数)	18 (已成年)	5 (标配) + 5.8 + 28	比较富，rRNA多，都带8

下一步行动：

现在闭上眼，试着回忆一下：“真核是成年人，讲究成双成对”，能不能推出它是 80S (40+60)，里面是 18S 和 28S？

ATCase（天冬氨酸转氨甲酰酶）

• CTP 是“亲儿子”（产物）：儿子太多了太吵，老爸（酶）就想罢工（抑制）。
• ATP 是“隔壁老王”（另一条途径的产物）：老王有钱（能量高/ATP多），喊你去干活，你就得去（激活）。

酰胺平面的组成

羧肽酶

羧肽酶 B (CP-B) —— “B” for Basic (碱性)

• 名号含义： 这个 “B” 就是 Basic（碱性）的意思。
• 猎杀目标： 它专门砍杀 C端 是碱性氨基酸的家伙。
• 受害者名单：
  • 精氨酸 (Arg)
  • 赖氨酸 (Lys)
  • （这俩都是带正电荷的“硬汉”，也是碱性氨基酸的代表）。

羧肽酶 A (CP-A) —— “A” for Aromatic (芳香) / Aliphatic (疏水)

• 名号含义： 这个 “A” 代表 Aromatic（芳香族）或者 Avoid Basic（避开碱性）。
• 猎杀目标： 它喜欢砍 C端 是芳香族（有香味）或者疏水侧链大的氨基酸。
• 受害者名单：
  • Phe (苯丙)、Tyr (酪)、Trp (色) —— 芳香族。
  • Leu (亮)、Ile (异亮) —— 大疏水基团。
• 禁忌（它的弱点）： 它绝对不杀碱性氨基酸（Arg, Lys）和脯氨酸（Pro）。

蛋白质水解三巨头

1. 酸水解 (6M HCl, 110℃) —— “最常用的酷刑”

• 优点： 彻底，干净，不消旋（L型还是L型）。
• 代价（缺点）：
  • Trp (色氨酸)：直接灰飞烟灭（被氧化破坏，完全回收率为0）。
  • Asn/Gln：变成了 Asp/Glu（脱酰胺）。
• 结论： 它是标准流程，但测不到色氨酸。

2. 碱水解 (NaOH/Ba(OH)2) —— “色氨酸的避难所”

• 优点： 专门为了救 Trp (色氨酸) 而存在的。只有在碱性条件下，色氨酸才能保住小命。
• 代价（缺点）：
  • 这是一招“七伤拳”。虽然救了色氨酸，但会把 Ser (丝), Thr (苏), Cys (半胱) 给弄死。
  • 而且会让氨基酸消旋（全部变成 D/L 混合物，很难分）。
• 结论： 平时不用，只有专门要测色氨酸的时候，才单独开这一炉。

3. 酶水解 —— “只有做实验（结构分析）才用”

• 用途： 用于测序（切成大段）、保留立体构型（不消旋）。
• 分析组分？ 绝对不用（因为切不干净 + 自身污染）。